食品中托拉塞米等19种利尿剂的测定（BJS 202409）解读
——食品补充检验方法系列解读之二十九
本文字数: 2246
近年来，许多宣称健康无添加的减肥产品受到爱美人士的热烈追捧，如酵素粉果冻、果蔬粉压片糖果、青梅果脯、果蔬汁饮料等，此类产品大多以日常零食为载体，暗示或宣称其具有较好的减肥功效。
食品是否能宣称具有减肥功效呢？在允许保健食品声称的24项保健功能中，有“有助于控制体内脂肪”的功能声称，但这种功能声称只能出现在经过严格注册备案的保健食品宣传中，普通食品不能宣传减肥功效。
不仅如此，根据相关政府部门的通报，部分不法商家为保证产品效果，在普通食品中非法添加利尿、致泻类化学物质，通过利尿、致泻达到减轻体重的目的，消费者食用后会出现严重腹泻等问题。既涉嫌虚假宣传，还又存在非法添加行为，这类行业痼疾急需被整治。
制定背景
为规避监管，在非法宣称减肥功效的食品中违法添加的利尿类药物，从监管较多的呋塞米、氢氯噻嗪等转向为市场曝光率低、未有标准检测方法的托拉塞米等化合物。此类化合物在临床上广泛用于治疗高血压、心力衰竭、肾衰竭、慢性心力衰竭及肝腹水等各种浮肿性疾病（如肝、肺、肾性水肿等）及尿崩症，食用过量会对器官造成极大的危害，甚至导致死亡。
由于市场曝光率低、标准检验方法欠缺，对含此类物质食品的监管执法存在极大困难。鉴于此，广东省广州市质量监督检测研究院在自研方法的基础上，通过增加目标物种类、扩大测定适用范围，并对方法的技术路线和方法性能参数进一步优化，最终形成了食品中托拉塞米等19种利尿剂的测定方法。
方法的先进性及实用性
通过调研并结合近几年相关案件通报，方法选取压片糖果、蜜饯、果冻、饮料、果蔬粉、饼干、代用茶、配制酒和发酵酒等可能宣称或暗示具有减肥作用的食品作为研究对象。对象选取具有针对性，覆盖了可能存在非法添加行为的食品类别，可满足监管要求。
总结汇总常见的利尿药或潜在具有利尿效果的临床药物，结合现有补充检验方法中已包含的化合物种类，最终选取托拉塞米、美托拉宗、依普利酮、托伐普坦、坎利酮、乙酰唑胺、精磺胺、氯噻嗪、氢氯噻嗪、氯噻酮、甲氯噻嗪、依匹噻嗪、苄噻嗪、环噻嗪、泊利噻嗪、苄氟噻嗪、环戊噻嗪、呋塞米和丙磺舒共19种利尿剂作为检测目标化合物。方法兼具先进性和实用性，可为检验机构提供相关检验依据，为政府部门进行最严格的监管提供技术支持。
操作要点
1.方法适用范围。本方法适用于压片糖果、蜜饯、果冻、饮料、果蔬粉、饼干、代用茶、配制酒和发酵酒中19种利尿剂的测定。
2.试样制备。为保证检测样品具有代表性，当样品量充足时，方法规定取不少于300g试样进行充分搅碎、均质或粉碎混匀制样；当全部样品量不足300g时，应取全部样品进行制样。蜜饯样品剪碎至2mm以下，果冻样品充分搅碎至浆状，含二氧化碳的液体样品通过加热或超声去除二氧化碳。制备好的试样放于冰箱冷藏保存。
3.试样处理。对于压片糖果、饮料、果蔬粉、饼干、代用茶、蜜饯、配制酒和发酵酒等样品，加入50%甲醇溶液超声提取，微孔滤膜过滤后采用高效液相色谱-串联质谱仪测定。对于果冻样品，由于含有卡拉胶、黄原胶等胶状物质，须先在约80℃水浴中将样品分散溶解（水浴过程中注意摇散），冷却至室温后加入少量甲醇超声提取，然后用10%甲醇稀释定容至刻度。溶液经微孔滤膜过滤后，采用高效液相色谱-串联质谱仪测定。
4.测定条件。本方法涉及利尿剂类化合物较多，各化合物性质差异较大。在多反应监测模式下，采用各化合物的单标标准工作液，在ESI+和ESI-
两种模式下进行扫描。分别选择各化合物特征准分子离子峰为母离子进行二级质谱分析，将响应值最大的碎片离子定为定量离子，将次级响应最大的碎片离子定为定性离子，优化得到质谱参数。为提升检测效率，方法采用正负切换同时扫描检测，其中托拉塞米、美托拉宗、依普利酮、托伐普坦、坎利酮在ESI+模式下检测，苄氟噻嗪、苄噻嗪、氯噻酮、环噻嗪、环戊噻嗪、泊利噻嗪、依匹噻嗪、精磺胺、甲氯噻嗪、乙酰唑胺、丙磺舒、氢氯噻嗪、氯噻嗪和呋塞米在ESI-模式下检测。
5.定量方式。由于本方法涉及目标物较多，检测食品基质差异明显，常规的非极性溶剂除脂、分散固相萃取净化、固相萃取柱净化、盐析净化等净化方式未能取得理想净化效果，方法采用基质匹配曲线进行外标法定量检测。配制基质匹配曲线所使用的阴性基质样品中各目标物含量须在方法检出限以下。同时，对于部分基质相对简单的压片糖果、发酵酒和配制酒样品，可采用溶剂标准工作溶液外标法定量。
食品是否能宣称具有减肥功效呢？在允许保健食品声称的24项保健功能中，有“有助于控制体内脂肪”的功能声称，但这种功能声称只能出现在经过严格注册备案的保健食品宣传中，普通食品不能宣传减肥功效。
不仅如此，根据相关政府部门的通报，部分不法商家为保证产品效果，在普通食品中非法添加利尿、致泻类化学物质，通过利尿、致泻达到减轻体重的目的，消费者食用后会出现严重腹泻等问题。既涉嫌虚假宣传，还又存在非法添加行为，这类行业痼疾急需被整治。
制定背景
为规避监管，在非法宣称减肥功效的食品中违法添加的利尿类药物，从监管较多的呋塞米、氢氯噻嗪等转向为市场曝光率低、未有标准检测方法的托拉塞米等化合物。此类化合物在临床上广泛用于治疗高血压、心力衰竭、肾衰竭、慢性心力衰竭及肝腹水等各种浮肿性疾病（如肝、肺、肾性水肿等）及尿崩症，食用过量会对器官造成极大的危害，甚至导致死亡。
由于市场曝光率低、标准检验方法欠缺，对含此类物质食品的监管执法存在极大困难。鉴于此，广东省广州市质量监督检测研究院在自研方法的基础上，通过增加目标物种类、扩大测定适用范围，并对方法的技术路线和方法性能参数进一步优化，最终形成了食品中托拉塞米等19种利尿剂的测定方法。
方法的先进性及实用性
通过调研并结合近几年相关案件通报，方法选取压片糖果、蜜饯、果冻、饮料、果蔬粉、饼干、代用茶、配制酒和发酵酒等可能宣称或暗示具有减肥作用的食品作为研究对象。对象选取具有针对性，覆盖了可能存在非法添加行为的食品类别，可满足监管要求。
总结汇总常见的利尿药或潜在具有利尿效果的临床药物，结合现有补充检验方法中已包含的化合物种类，最终选取托拉塞米、美托拉宗、依普利酮、托伐普坦、坎利酮、乙酰唑胺、精磺胺、氯噻嗪、氢氯噻嗪、氯噻酮、甲氯噻嗪、依匹噻嗪、苄噻嗪、环噻嗪、泊利噻嗪、苄氟噻嗪、环戊噻嗪、呋塞米和丙磺舒共19种利尿剂作为检测目标化合物。方法兼具先进性和实用性，可为检验机构提供相关检验依据，为政府部门进行最严格的监管提供技术支持。
操作要点
1.方法适用范围。本方法适用于压片糖果、蜜饯、果冻、饮料、果蔬粉、饼干、代用茶、配制酒和发酵酒中19种利尿剂的测定。
2.试样制备。为保证检测样品具有代表性，当样品量充足时，方法规定取不少于300g试样进行充分搅碎、均质或粉碎混匀制样；当全部样品量不足300g时，应取全部样品进行制样。蜜饯样品剪碎至2mm以下，果冻样品充分搅碎至浆状，含二氧化碳的液体样品通过加热或超声去除二氧化碳。制备好的试样放于冰箱冷藏保存。
3.试样处理。对于压片糖果、饮料、果蔬粉、饼干、代用茶、蜜饯、配制酒和发酵酒等样品，加入50%甲醇溶液超声提取，微孔滤膜过滤后采用高效液相色谱-串联质谱仪测定。对于果冻样品，由于含有卡拉胶、黄原胶等胶状物质，须先在约80℃水浴中将样品分散溶解（水浴过程中注意摇散），冷却至室温后加入少量甲醇超声提取，然后用10%甲醇稀释定容至刻度。溶液经微孔滤膜过滤后，采用高效液相色谱-串联质谱仪测定。
4.测定条件。本方法涉及利尿剂类化合物较多，各化合物性质差异较大。在多反应监测模式下，采用各化合物的单标标准工作液，在ESI+和ESI-
两种模式下进行扫描。分别选择各化合物特征准分子离子峰为母离子进行二级质谱分析，将响应值最大的碎片离子定为定量离子，将次级响应最大的碎片离子定为定性离子，优化得到质谱参数。为提升检测效率，方法采用正负切换同时扫描检测，其中托拉塞米、美托拉宗、依普利酮、托伐普坦、坎利酮在ESI+模式下检测，苄氟噻嗪、苄噻嗪、氯噻酮、环噻嗪、环戊噻嗪、泊利噻嗪、依匹噻嗪、精磺胺、甲氯噻嗪、乙酰唑胺、丙磺舒、氢氯噻嗪、氯噻嗪和呋塞米在ESI-模式下检测。
5.定量方式。由于本方法涉及目标物较多，检测食品基质差异明显，常规的非极性溶剂除脂、分散固相萃取净化、固相萃取柱净化、盐析净化等净化方式未能取得理想净化效果，方法采用基质匹配曲线进行外标法定量检测。配制基质匹配曲线所使用的阴性基质样品中各目标物含量须在方法检出限以下。同时，对于部分基质相对简单的压片糖果、发酵酒和配制酒样品，可采用溶剂标准工作溶液外标法定量。
□广东省广州市质量监督检测研究院 寻知庆 黄金凤
